乌榄叶水提取物对大鼠离体心脏灌流的作用探究

　　乌榄（CanariumPimelaLeeth）系橄榄科常绿大乔木，其果实可供生食，且有止血、利水、解毒等功效。其根叶具有舒筋活络、袪风除湿、清热解毒，消肿止痛等功效。相关实验研究发现，乌榄叶水提物对蛙心心肌收缩力有快速、显著的减弱作用[1]；对正常大鼠和应激高血压大鼠都具有显著的降压作用，其中对异常血压的作用更强[2，3]；对大鼠血管平滑肌有显著舒张作用[4]和对心功能具有双向性[5]。为进一步探讨其对心功能及冠脉流量的作用，本实验采用Langendorff离体心脏灌流装置观察乌榄叶水提取物对正常离体大鼠心脏的影响。

　　1材料

　　1.1药品试剂乌榄叶水提取物由广东药学院药物化学教研室提供。实验时用蒸馏水稀释，经3000r/min离心30min后取上清液，调试pH值至7.0，用0.22μm一次性微孔过滤器滤过，取滤液配成相关浓度药液进行药效观测。丹参注射液，正大青春宝药业有限公司生产，批号：1111022。

　　1.2仪器MedLab生物信号采集处理系统（南京美易公司生产）、YP100张力换能器、langenendorff灌注装置。

　　1.3实验动物SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重（250±50）g，由广东省动物实验中心提供。

　　2方法

　　2.1实验分组24只SD大鼠随机分为3组，每组8只。分别为空白对照组、乌榄叶水提取物组（简称乌叶组）、丹参阳性对照组（简称丹参组）。给药方法：空白对照组持续灌流40min；乌叶组在灌流过程中加入生药浓度为0.1g生药/ml乌榄叶水提取物灌流液；丹参组则加入0.15g生药/ml丹参灌流液；药物灌流液均用含氧任洛氏液配制。

　　2.2实验方法腹腔注射肝素（1000U/kg），15min后断头迅速开胸暴露心脏，保留1cm左右主动脉，摘取心脏于含氧冷任洛氏液的玻璃器皿内，排空残留血液，将主动脉固定于Langendorff灌流装置的心脏套管上，用95%O2与5%CO2饱和的任洛氏液进行灌流，经张力换能器连接MedLab生物信号采集处理系统。稳定10min待心率及心肌收缩力恢复正常，继续灌流40min。其中前10min作为前对照，后30min分别给予相应药物浓度的含氧任洛氏液持续灌流，记录心肌收缩张力、冠脉流量和心率，观察记录给药前及给药后各值变化情况。

　　2.3统计学方法实验数据以x-+s表示。用SPSS19.0系统进行统计学分析，前后对照用配对t检验，组间对照用方差分析。

　　3结果

　　3.1乌榄叶水提取物药效与冠脉流量的关系从表1可见，在灌流药物的过程中，乌榄叶水提取物组的冠脉流量均有所增加。在第10分钟至第15分钟作用最显著，与空白对照组比较有显著统计学意义。同时可见给予药物灌流第15分钟后，空白组大鼠冠脉流量出现逐渐减少，而乌榄叶水提取物组和丹参阳性对照组均无出现此现象。表明：乌榄叶水提取物可能对冠状动脉具有一定的保护作用，并且可能对冠脉具有一定舒张作用，从而能维持冠脉流量基本恒定，避免其减少，其作用效果与丹参的类似。

　　3.2乌榄叶水提取物药效与心肌收缩力的关系结果表明（见表2），在给予灌流液后第4分钟，乌榄叶水提取物组心肌收缩力与给药前相比增强（P<0.05），并于第6分钟，达到峰值，与空白组和丹参组比较差异具有统计学意义（P<0.01），而且有别于此时丹参阳性对照组心肌收缩力减少的现象。此外，在10分钟后，乌榄叶水提取物组心肌收缩力有所回落，与给药前差异无统计学意义，作用持续时间约20分钟。结果提示：乌榄叶水提取物可增强心肌收缩力。

　　3.3乌榄叶水提取物药效与大鼠心率的关系从表3观察到，在灌流药物第4分钟后，乌榄叶水提取物组心率持续降低，与给药前相比具有统计学意义（P<0.05或P<0.01），并且其下降幅度高于同期空白组，此外，其下降幅度于第4分钟和第6分钟显著高于丹参组（P<0.01），而第10分钟后，其降低效果与丹参组类似。结果表明：乌榄叶水提取物具有较强的降心率作用，并且起效快于、强于丹参注射液。

　　4讨论

　　在开发心血管药物时，研究药物对离体心脏的冠状动脉及心功能的影响具有重要的地位。目前，Langendorff离体心脏法是研究药物对冠状动脉的影响的常用手段，其优势在于可排除神经及体液等因素而得到药物对冠状动脉以及心脏代谢的直接药理作用。

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