血清药理学方法的问题主要集中在实验动物的选择、给药次数与时间、给药剂量、含药血清的采集以及含药血清的灭活等几个方面，其关键技术在于含药血清的采集、含药血清的预处理以及血清药理实验作用效应-剂量关系这3个方面。血清药理学在方法学上解决了中药复方提取物直接应用于离体实验的难点,可以研究进入体内的中药有效成分或其代谢产物的药理作用。

　　2.2中药脑脊液药理学

　　2.2.1脑脊液药理学方法的建立及优势

　　由于中枢神经系统血脑屏障的存在，使脑的内环境、神经元及神经胶质细胞生存的微环境与自身血液系统有着显著的不同,而且药物是否能透过血脑屏障已成为研究中药神经保护作用的关键;同时,由于血清中含有多种活性酶及蛋白,对神经细胞均有一定的影响。

　　梅建勋等、冯淑怡等的实验证明也了这一点，并发现利用含药脑脊液进行中药对中枢神经系统的药效观察明显优于血清药理学方法。基于上述原因,梅建勋等在研究中药复方对神经保护作用时,初次提出了脑脊液药理学的概念。在该研究小组随后的清脑益智方对谷氨酸损伤神经保护作用的实验研究中,正式建立了中药脑脊液药理学方法,即用含药脑脊液代替含药血清,研究中药及其复方对神经系统的保护作用，该实验结果显示：无论是正常血清还是药物血清均显现对神经元的毒害作用，对于观察中药的药理作用产生了障碍，而采用脑脊液则可以克服上述缺点。

　　脑脊液药理学优势主要有以下几个方面:一,中药及复方的化学成分,在生物体内经生物转化成活性成分,或代谢后失活,或没有被吸收入体内,或通过第2、3信使等信号级联反应间接起作用,这使得中药及复方的研究趋于困难;又由于化学成分或生物活性成分通过血脑屏障的数量有限;而脑脊液药理学的方法可以简化这种研究过程。二,脑脊液药理学排除了体外实验的各种干扰因素,可直接以观察中药及复方作用于中枢神经系统的药效学效应为导向,确证中药及复方药物中主要的有效成分及生物活性部分。三,血清本身内源性成分复杂,含有多种活性物质对神经细胞有一定影响;而脑脊液避免了血清本身的毒害作用所遮盖的药效作用。四,脑脊液药理学方法不但适用于口服给药的中药对神经保护作用研究,也适合于注射给药的药物研究。五,脑脊液药理学更解决了中药大分子能否通过血脑屏障的问题,在中枢神经系统的药效物质基础和作用机制研究中,更具有科学性、真实性、可行性。

　　2.2.2中药脑脊液药理学方法研究中的关键技术

　　脑脊液药理学的实验方法,是一种新兴的主要评价作用于中枢神经系统药物的药理实验方法学，其实验条件尚不十分成熟,还需要进一步完善。张启春等，通过观察当归芍药散精简方(FBD)含药脑脊液在不同条件下(给药方案、添加量、处理方法、批次及保存时间)对过氧化氢所致PC12细胞损伤模型的保护作用,对脑脊液药理实验条件规范化进行了初步探讨。而该方法的关键在于获得有效的含药脑脊液，其主要环节包括以下几方面：一,动物的选择,一般多选用大鼠、家兔、犬等动物来制备含药脑脊液,由于各种动物间存在种属差异,且脑脊液含量相对较少,采集比较困难。因此在采用脑脊液药理学方法时,一方面,应考虑制备脑脊液的动物应与获得离体细胞的动物相一致,从而缩小动物脑脊液间在理化、生物等特性上的差异,减少因种属差异造成的免疫反应;另一方面,根据实验的需求,确定含药脑脊液的用量。二,给药次数及给药剂量。大多实验研究通过增加给药剂量倍数来弥补实验时所稀释倍数;但是,含药脑脊液组和含药脑脊液冻干浓缩组比较,对β样淀粉蛋白所致细胞损伤研究显示,含药脑脊液冻干浓缩组保护作用较强,提示增加给药剂量不一定被动物吸收、分布和代谢等,这可能导致药效浓度与脑内产生效应的内环境存在差异所致。因此，为了使试验条件更接近于药物在体内产生效应的内环境,建议含药脑脊液的制备,可采用连续多次给药方案,无需灭活处理,一般以体外添加终体积的10%、-20℃保存、不超过30d为宜。三,脑脊液的采集方法及制备技术。准确的采集足量的含药脑脊液,是脑脊液药理学方法中至关重要的一步。富宏等,采用经皮穿刺延髓池抽取兔和大鼠脑脊液的方法;曹远东等，对比了两种采集SD大鼠脑脊液方法后，认为经枕骨大孔法简单易行，损伤小，并发症少，成功率高，优于经侧脑室法；李惠勉等设计了一种经颅钻孔开窗置管采集兔脑脊液的方法，此方法采集脑脊液量大且快速省时。

　　2.2.3脑脊液药理学的应用现状及前景

　　近年来，脑脊液药理学的应用主要集中在中药复方对防治脑血管疾病的作用机制的研究上,主要包括对海马神经细胞、皮层神经细胞、凋亡的抑制作用以及对PC12细胞、星形胶质细胞的保护作用以及星形胶质细胞CRL-2541活力和神经胶质纤维酸性蛋白GFAP表达的影响等的体外观察。

　　脑脊液药理学方法为研究中药及其复方在中枢神经系统疾病的预防和治疗方面提供了新的思路及行之有效的途径，具有良好的应用前景。