抗癫痫西药药物成分的血药浓度监测

　　[摘要] 目的探讨高效液相色谱测定人体托吡酯血药浓度的方法与效果。方法选择Agilent 1100高效液相色谱仪测定人体血浆中的托吡酯的浓度。结果托吡酯的线性方程为Y=6.25×10-4X+1.08×10-2，线形范围为0.05～10.00?g/mL，提取回收率为92.1%，在血浆中的平均浓度为0.260?g/mL。结论高效液相色谱测定人体血浆中的托吡酯的浓度方法简单、可行、灵敏度高，具有良好的回收率。
　　[关键词] 托吡酯；血药浓度；高效液相色谱
　　[中图分类号] R927.2 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）24-81-02
　　The blood concentration monitoring for antiepileptic medicine- topiramate
　　LV Xuecheng
　　Shangqiu City First People's Hospital， Shangqiu 476000，China
　　[Abstract] Objective To investigate the ways and effects of HPLC for detecting human plasma concentration of topiramate. Methods Used the Agilent 1100 HPLC to detect human plasma topiramate concentrations. Results Topiramate linear equation was Y=6.25×10-4X+1.08×10-2， the linear range was 0.05-10.00μg/mL， extraction recovery was 92.1%， while the average plasma concentration was 0.260 μg/mL. Conclusion HPLC determination of human plasma topiramate is simple， practical， high sensitivity that has good recovery.
　　[Key words] Topiramate； Plasma concentration； HPLC
　　癫痫是最常见的神经疾病之一，患病率为6‰左右，当前随着我国癫痫发病率的增高，越来越多的人被癫痫困扰，长期不治愈可伴随有严重的身心后果，其常伴有记忆、学习、行为等认知功能障碍[1]。在药物治疗中，当前应用比较多的是托吡酯，托吡酯可增强抑制性神经递质作用来发挥治疗效果[2]。不过在托吡酯被吸收后，如何进行血药色谱浓度测定就值得探讨[3]。本研究采用高效液相色谱测定了人体血浆中托吡酯的浓度，现报道如下。
　　1 试剂与仪器
　　1.1 试剂
　　托吡酯及内标金刚烷胺的标准品购自西安杨森制药有限公司和中国药品生物制品检定所，纯度均大于99%；甲醇、乙腈为色谱纯（北京化工分公司），水为双蒸超纯水，乙腈、乙酸、丙酮、三乙胺等其他试剂均为分析纯，血浆样品来自健康受试者，血浆样品保存在-40℃的冰箱。
　　1.2 仪器
　　超级恒温水浴锅购自本地区仪器厂，HHS型不锈钢电热恒温水浴锅（武汉市琴台医疗器械厂），CS101型电热鼓风干燥箱（重庆试验设备厂）。 Agilent 1100高效液相色谱仪（美国Agilent公司），TG16G台式高速离心机（上海生物工程有限公司），BS110型电子天平（北京三博医药有限公司），RE52AA旋转蒸发仪（上海生物工程仪器厂），WH-2微型涡旋混合仪（沪西分析仪器厂有限公司）。
　　2 方法与结果
　　2.1 色谱与质谱条件
　　选择Ultimate C18分析色谱柱（250mm× 4.6mm，5?m）；流动相：乙腈-磷酸盐缓冲液（pH=5）；柱温25℃；流速是1.0mL/min；柱温：35℃；荧光检测器检测波长为315nm，激发波长为260nm。
　　2.2 标准溶液的制备
　　托吡酯标准溶液：称取0.50g托吡酯标准品，置于50mL容量瓶中，用1∶1的甲醇-水溶解并定容至刻度，从而得到10.0mg/mL托吡酯标准溶液。内标溶液：称取金刚烷胺12.0mg，溶解方法同托吡酯标，得240.0?g/mL的内标溶液。
　　2.3 样品的制备
　　移取血浆样品0.5 ～ 1.5mL的EP管中，加入0.5mL丙酮和10?L内标金刚烷胺，混合后以12 000r/min离心10min，转移上清液0.8mL至另外的EP管中，加入10?L异硫氰酸苯酯和5?L三乙胺，混匀后进行60℃的恒温水浴中衍生反应1h，然后吹干，再用200?L的流动相重复上述步骤，进样20?L分析。
　　2.4 标准曲线的绘制
　　将托吡酯标准溶液用血浆进行梯度稀释成托吡酯浓度分别为0.10、0.20、0.50、1.00、2.00?g/mL的样品，然后以托吡酯的峰面积与内标的峰面积比值（Y）为纵坐标，以浓度（X）为横坐标作加权线性回归，计算得到托吡酯的线性方程为：Y=6.25×10-4X +1.08×10-2，线形范围为0.05～10.00?g/mL。

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