摘要:以常规粉碎和超微粉碎的苦荞(Fagopyrum esculentum Moench)花期植株粉末作为原料,研究不同浸提溶剂和辅助提取方法对总黄酮浸提得率的影响。结果表明,超微粉碎、超声波提取和甲醇浸提能显著提高苦荞花期植株中总黄酮的浸提得率。提取的最佳条件为浸提温度50 ℃,提取时间3 min,固液比1∶30(m∶V),总黄酮浸提得率为5.91%。 关键词:苦荞(Fagopyrum esculentum Moench);花期植株;总黄酮;浸提条件 中图分类号: S517;Q819 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)15-3613-04 Extraction Conditions of Flavonoids in the Florescence of Fagopyrum esculentum Moench Plants JIAO Yu (Shool of Applied and Chemical Engineering, Xichang College, Xichang 615013, Sichuan, China) Abstract: Using the florescence plants powder of Fagopyrum esculentum Moench treated with the conventional comminution and the ultrafine comminution as materials, the effects of the different solvents and methods on the yield of total flavonoids in power of Fagopyrum esculentum Moench were studied. The results showed that ultrafine grinding, ultrasonic extraction and methanol extraction could significantly improve the yield of total flavonoids of Fagopyrum esculentum Moench florescence plants. The optimal conditions were extraction temperature 50 ℃, extraction time of 3 min, solid-liquid ratio 1∶30(m∶V), with the highest yield of 5.91%. Key words:Fagopyrum esculentum Moench;florescence plants;total flavonoids;extraction conditions 苦荞(Fagopyrum esculentum Moench)为蓼科双子叶药食兼用植物,主要分布在我国西南地区的四川、云南、贵州等地[1],凉山也是苦荞的重要产地之一。苦荞不仅营养丰富,还含有大量的黄酮类化合物(Flavonoids)[2-4]。黄酮类化合物是一类具有较强生物活性的物质,具有多种药理及保健作用[5-13],如抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗糖尿病、清除自由基等作用。苦荞的叶、茎、花和子粒均具有开发价值,目前有关苦荞中黄酮类化合物提取的研究多以苦荞子粒和壳为原料[14,15],苦荞植株常作为燃料或被丢弃,然而苦荞花期植株是整个生长阶段总黄酮含量最高的时期,且单位面积苦荞花期植株产量远高于苦荞,若能从中提取黄酮类化合物,不但可以利用资源,改变黄酮来源短缺的问题,降低苦荞种植成本和黄酮原料成本,也可进一步提高苦荞的价值[16]。本试验以苦荞花期植株原料提取总黄酮,为充分利用苦荞资源,开发其潜在经济价值提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 苦荞花期植株,采自西昌市大箐乡幸福村一组。 1.2 试剂与仪器 无水乙醇95%(AR级)、甲醇(AR级)、三氯化铝溶液(AR级)、乙酸钾溶液(AR级)、芦丁标液,由凉山州质量技术监督局提供;苯、乙醚、氯仿、石油醚均为分析纯。 DGG-9420A型电热鼓风干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司)、WK-150型粉碎机、ESJ200-4型电子天平(上海良平仪器仪表有限公司)、722G型可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)、YHW-SYH-K型电热恒温水浴锅(北京市长风仪器仪表公司)、ZKJ-1型循环水真空泵(上海嘉鹏科技有限公司)、FW-400A型倾斜式高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司)、UP2200H型超声波清洗器(南京莱步科技实业有限公司)。 1.3 试验方法 1.3.1 标准曲线的绘制 用移液管分别吸取0.060 8 mg/mL芦丁标液0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 mL,分别置于10 mL 容量瓶中,加入2 mL 0.1 mol/L三氯化铝、3 mL 1 mol/L乙酸钾,用体积比为7∶3的甲醇-水溶液定容至刻度,摇匀,室温下放置30 min,以空白为对照。标准曲线中芦丁质量浓度分别为0.001 52、0.003 04、0.006 08、0.012 16、0.018 24、0.024 32 mg/mL。在波长420 nm处测定溶液吸光度。以吸光度为纵坐标,芦丁质量浓度为横坐标绘制标准曲线。 1.3.2 苦荞花期植株溶液的制备 将收割后的苦荞花期植株清洗后,均匀地放在电热鼓风干燥箱中,95~105 ℃充分干燥4~6 h后粉碎机粉碎,再取一半粉碎试样用超微粉碎机粉碎,装袋密封备用。 称取2.000 g试样,置于150 mL具塞三角瓶中,按固液比(m∶v)加入浸提溶剂,塞紧瓶塞,将三角瓶置于恒温水浴锅或超声波浸提,提取时间、温度按以下要求进行设定,趁热减压抽滤,清洗滤纸和残渣,合并滤液,冷却至室温用相应浸提溶剂定容于100 mL容量瓶中。准确吸取0.1 mL定容后溶液,置于10 mL容量瓶中,分别加入2 mL 0.1 mol/L三氯化铝、3 mL 1 mol/L乙酸钾,用相应浸提溶剂定容至刻度,摇匀,室温下放置30 min,即为待测液[17]。 |